Analyse qualitative quand réalisation un test de drogues

Car la majorité des substances défendues dans le sport professionnel pour l'épreuve positive résulte il est assez simple de recevoir la confirmation de leur présence à un échantillon d'urine. Comme beaucoup de méthodes pour la projection et l'obtention des preuves sont basées sur l'application d'une chromatography dans la combinaison avec la spectroscopie de masse, les recommandations pour l'identification de composés chimiques au moyen des systèmes de GH-MS et de ZHH-MME ont été développées (/MME). La présence de substance est considérée ratifiée si sur la représentation relative d'une certaine quantité d'ions caractéristiques (selon la sorte appliquée de masse spectrometry) l'échantillon est comparable, en tenant compte des tolérances, avec l'échantillon correspondant de la norme faite subir à l'analyse semblable. En plus le temps de déduction de substance ne devrait pas différer (dans un intervalle admissible d'une déviation) dans l'analyse hromatografic d'un échantillon d'urine de l'athlète et d'un échantillon de contrôle de l'urine contenant la substance exigée. Donc pour la caractéristique et l'identification de substances dans les échantillons, aussi difficiles pour l'analyse, que les analyses d'urine, les renseignements de valeur définissants sur le hromatografic et, surtout, la masse et les paramètres spectrometer des composés chimiques étudiés ont. De nombreuses recherches de masse et des caractéristiques spectrometer de la stimulation ou du masquage des médecines sont jusqu'à présent conduites et aussi les méthodes pour leur détection dans le but de réalisation un test de drogues est développé (Masse et autres, 1989 ; de Boer et autres, 1991 ; Donike et autres, 1995 ; Ayotte et autres, 1996 ; Shackleton et autres, 1997 ; Tonnelles, 1998 ; Aguilera et autres, 1999 ; Thevis et autres, 2000, 2001, 2002, 2003a).

Plus loin nous considérerons les principes généraux de réalisation l'analyse de certaines de ces substances.

Stéroïdes anabolisants

En considérant des données statistiques concernant les résultats des tests antidopage portés et les classes des substances défendues révélées, il est possible de remarquer que le plus souvent comme le dope dans les stéroïdes d'anabolique sportifs s'appliquent. Par exemple, plus de 40 % des substances défendues trouvées par les laboratoires accrédités par l'IOC en 2001 étaient des stéroïdes anabolisants. Un de représentants de ce groupe est la testostérone dérivée methyltestosterone, reçue par le remplacement avec le groupe en métal d'une balance restante d'hydrogène à S-17. Les stéroïdes anabolisants dans la majorité sont activement impliqués dans les processus du métabolisme, en formant par conséquent une série de métabolites, par exemple la récupération de ketogroups, l'oxydation de groupes hydroxyl, un hydroxylation et aussi oxydation/récupération de carbone de communications — le carbone dans une amande de molécule de stéroïde (Schanzer, 1996). Après cette phase I de métabolisme et avant l'allocation puisqu'une partie d'urine est là la phase II de métabolisme, à savoir la conjugaison de produits de la phase I à glyukuropida ou à sulfates.

La stratégie communément acceptée d'identification de métabolites de stéroïdes anabolisants est basée sur l'hydrolyse enzymatic de métabolites de la phase II pendant laquelle les métabolites de la phase I, leur nettoyage, la concentration, derivatization et l'analyse ultérieure de GH-MS sont formés. La majorité de métabolites de stéroïdes anabolisants, à part nandrolon de laquelle ce sera une question n'est pas capable ci-dessous pour être formée dans un corps humain de la façon naturelle donc en cas de la détection de ces connexions dans l'urine de l'athlète fait subir à un test de drogues que le message sur le résultat d'essai positif sera fait.

Stéroïdes conçus

Le problème d'utilisation des soi-disant stéroïdes conçus (le stéroïde de créateur) dans le sport et dans le monde scientifique s'accumule comme une avalanche après en octobre de 2003 (le Chevalier, 2003) le laboratoire d'un test de drogues d'université de Californie à Los Angeles a trouvé le dérivé de substance de gestrinon la préparation médicinale utilisé pour le traitement d'un endometriosis. Le reste d'Ethynesilt localisé à 17ème Carboneum de cette obligation mène à la formation d'hormone de stéroïde de tetragidrogestrinon (THG) qui peut être considéré comme un analogue d'un stéroïde anabolisant extrêmement efficace de trenbolone, cependant les essais cliniques d'influence physiologique et les effets secondaires de THG n'ont été jamais réalisés. La stratégie standard d'un test de drogues dans les laboratoires de recherche que l'on renvoyait toujours sur la détection des médicaments pharmaceutiques qui ont passé des épreuves cliniques a l'air de gagner évidemment insuffisamment pour surmonter l'aspiration de certains athlètes une victoire est tombée des rivaux frauduleusement, en mettant la propre santé en même temps menacée. En considérant le fait que beaucoup de procédures de projection sont basées sur la comparaison d'échantillons standard avec les essais d'urine avec l'utilisation de telles techniques d'une masse spectrometry comme la surveillance des ions de jeu (la surveillance d'ion choisie, SIM) ou la surveillance de réactions multiples (la surveillance de réaction multiple, MRM), les dérivés inconnus ou les préparations médicinales, telles que THG, sont "invisibles * pour les procédures standard de contrôle. Il provoque le besoin de développement de techniques plus flexibles de contrôle qui permettrait de découvrir les substances tant connues, qu'inconnues possédant la structure semblable, par exemple le cœur de stéroïde général qui est possible en principe, en particulier, avec l'utilisation des systèmes modernes GH-MS/MS. Vous pouvez aussi aimer Testalamin.

Stéroïdes endogènes

Si en cas de l'application de stéroïdes anabolisants dans l'urine il y a des métabolites qui ne sont pas observés normaux, l'utilisation de testostérone comme le dope pour trouver beaucoup plus difficile puisque cette hormone est produite dans un corps humain. Les approches différentes, dont la plus répandue sont la détermination d'un rapport testostérone / epitestosteron (T/E) et soi-disant masse et mesure spectrometer d'un rapport d'isotopes fermes de carbone (IRMS), ont été développées à cette fin. Le profil de stéroïdes endogènes peut varier dans les situations différentes (Geyer et autres, 1996), cependant on a montré que le rapport Ò/Ý est un indicateur fiable d'utilisation de testostérone comme le dope comme les produits d'un epitestosterop se produit sans tenir compte de la testostérone. Comme le seuil la valeur de rapport Ò/Ý les 6 égaux sont acceptés, cependant en cas de l'excès d'un seuil le résultat d'essai positif est enregistré pas directement, l'athlète doit passer la recherche de plus dirigée vers le contrôle du niveau de testostérone levé naturel.

L'augmentation de la disponibilité de l'analyse d'isotope par la méthode pour la masse spectrometry (IRMS) a promu la réalisation un certain nombre de recherches qui ont montré une possibilité de détection de distinctions entre la testostérone endogène et synthétique au moyen de cette approche. En particulier, il a été établi que la testostérone naturelle diffère des analogues synthétisés de la façon chimique qui sont utilisés comme les fournitures médicales basées sur le rapport d'isotopes de carbone, 3C/, 2C. L'application de GH avec la combustion ultérieure de la substance analysée et l'analyse du dioxyde de carbone formé permet en même temps d'obtenir des renseignements sur l'origine de testostérone basée sur les isotopes cela d'un rapport |3C et, JC (Homing et autres, 1998 ; Aguilera et autres, 1999).

Diurétiques et beta2-agonists

Aussi les diurétiques et β2-àãîíèñòû appartiennent aux substances que l'analyse est d'habitude faite au moyen de GH-MS (/MME). En particulier, le groupe de diurétiques est caractérisé par une variété chimique des médecines nommées dans les buts semblables ou identiques. Adressez-vous aux représentants de ce groupe de substances l'ionisation principalement négative (Thieme et autres, 2001 ; Thevis et autres, 2002, 2003a) qui est provoqué par leurs propriétés acides, cependant pour quelques diurétiques, dans triamteren particulier, est exigé l'ionisation positive. Pour β2-àãîíèñòîâ l'approche principale est la substance analysée avec la détection ultérieure de molécule positivement chargée. Comme il est décrit dans les "Méthodes d'analyse", les sources d'ions intégrant GH à MME permettent d'habitude de produire le protonated ou les molécules deprotoniron sans leur fragmentation visible. Ainsi, les renseignements structurels sur les substances analysées, la spécificité et la sélectivité d'analyseurs de masse sont fournis l'application de la dissociation (la CAD) des médecines ionisées incitées par les collisions et l'analyse ultérieure de fragments dérivés. À cette fin il est nécessaire d'avoir des données de l'affinité aux protons et au comportement de produits de dissociation après l'activation efficace des molécules analysées au moyen de la CAD qui diffère de façon significative sur les mécanismes de fragmentation de molécules du coup électronique (EI). Pour les diurétiques et aussi pour le volume β2-àãîíèñòîâ, à part la réalisation salbutamol l'analyse de haute qualité est assez. D'habitude hromatogramma des ions extraits font la détection assez sensible possible de ces substances dans les épreuves biologiques et la conclusion positive de leur disponibilité est tirée par un pas la base de prédominance numérique essentielle de leurs ions résultants. En 2001 environ 17,5 % de cas de résultats positifs réalisés dans 25 laboratoires d'un test de drogues accrédité par l'IOC ont appartenu à l'application β2-agonist, les diurétiques ont été trouvés dans 5 % de cas.

Test de drogues : analyse quantitative

Pour quelques substances, en incluant stimulators, telles qu'ephedrine, métabolites de stéroïdes anabolisants, tel, que nandrolon et β2-agonists, tels que salbutamol, le niveau de seuil est établi, basé sur la comparaison avec laquelle la conclusion des résultats d'essai positifs ou négatifs est tirée. Les raisons différentes sont devenues la base pour une telle décision. Ephedrines sont une partie de beaucoup de médecines antifroides donc par les règles antidoping leur application est juridique si le contenu de dérivés de norefedrin, ephedrine et de pseudoephedrine dans l'urine n'excède pas 5, 10 ou 25 mgs-millilitres' 1 respectivement. Le groupe de plaisirs de Salbutamol de simpatomimetik, est un de 4 permis pour l'utilisation β2-àãîíèñòîâ (avec salmeteroly, terbutaliny et formoteroly) sur la condition de leur application dans la forme d'inhalation. Pour déterminer comment la médecine a été appliquée (oralno dans la forme de comprimés ou dans la forme d'un aérosol) et dans ce que le dosage, assez difficile, pendant les compétitions signale de la présence de salbutamol lors des épreuves dans la fédération pertinente ; si le contenu de substance excède 100 ng-millilitres '1. Pendant la période entre les compétitions le niveau de seuil de 1 mg-millilitre "1 comme en utilisant un simpatomimetik dans les doses excédant de façon significative des effets anabolisants thérapeutiques est observé est établi. La présence d'un métabolite de nandrolon 5a estrai Za ol 17 odin (norandrosterona) dans l'urine d'athlètes professionnels peut être dans une certaine mesure provoquée par les produits endogènes donc pour ce contenu de seuil de substance 2 ig-ml*1 pour les hommes et 5 ng-millilitres' 1 pour les femmes est établi. Pour les raisons pour les valeurs reçues de nombreuses recherches ont été conduites, les facteurs différents qui peuvent influencer le niveau de formation endogène de ce métabolite, par exemple une tension physiologique considérable ou une grossesse qui mènent à l'augmentation essentielle du contenu de cette substance dans l'urine ont été aussi considérés. La détermination quantitative de ces connexions est exécutée avec l'utilisation de calibrer des courbes qui construisent basé sur les résultats de détermination par les méthodes standard pour les normes intérieures correspondantes ayant des propriétés physiques et chimiques semblables ou identiques (Schanzer, Donike, 1995).

Conclusion

Quand la réalisation un test de drogues l'analyse de connexions basses et moléculaires est basée principalement sur l'application de hromatografic et masse et méthodes spectrometer qui font la détection possible et l'identification de médicaments interdits et de leurs métabolites dans les épreuves de liquides biologiques, telles que le sang et l'urine. Pendant que dans d'anciennes années l'analyse a été réalisée principalement par une chromatography du gaz avec la détection des produits divisés les analyseurs différents, par exemple ardents et l'ionisation et les détecteurs de phosphore de l'azote et aussi la masse et les analyseurs spectrometer. Dans les derniers travaux la chromatography généralement liquide quels produits de séparation après l'ionisation avec une pression atmosphérique sont exposés la masse spectrometer à l'analyse comme cette approche permet de réduire de façon significative le temps de préparation d'échantillons est appliqué et n'exige pas un derivatization des substances analysées. En plus grâce à l'application triple d'analyseurs et mise en œuvre de pièges ionique de masse plus flexible et expériences de spectrometer dirigées vers la détermination et la caractéristique des médecines connues et aussi les substances conçues inconnues sont devenues possibles qui promeut aussi le renforcement de lutte contre le dope et l'utilisation illégale de médicaments interdits. À partir du moment de création de la liste des substances défendues et des méthodes pour la stimulation la gamme de substances en lesquelles l'attention quand la réalisation un test de drogues est payé cesse de changer et les laboratoires dans ce processus dynamique devrait développer et modifier constamment des méthodes d'analyse, en augmentant leur sensibilité, spécificité et adaptabilité à la solution de nouvelles tâches de limiter des abus de médecines dans le sport et aussi sauver des athlètes de faux soupçons. Et les ici nouveaux développements dans le domaine d'une grande vitesse et une chromatography extrêmement efficace, une masse et spectrometer, en ayant la haute résolution et la sensibilité et aussi les acceptations modernes d'ionisation fournissent aux laboratoires analytiques des outils de valeur qui permettent d'obtenir l'information encore plus détaillée des substances appliquées, par exemple de leur structure et métabolisme et développer des délais impartis d'identification d'abus des médecines stimulantes. Autant de médecines, telles que les stéroïdes anabolisants, sont appliquées pendant la période entre les compétitions, mais gardent en même temps l'effet stimulant depuis plusieurs semaines, le test de drogues véritable exige que la réalisation analyse tant pendant les compétitions, que dans le de la période de compétition. En plus la spécificité maximum et la sensibilité de procédures analytiques sont exigées.